Baltymų koncentracijos skaičiuoklė

Autorius: Henrick Yau

Baltymų koncentracijos skaičiuoklė

Tipinės vertės svyruoja nuo 0.5 iki 2.0
Standartinės kiuvetės turi 1 cm ilgį
Jei mėginys buvo skiedžiamas prieš matavimą (pvz., 5 = 1:5 skiedimas)

Baltymų koncentracija, naudojant absorbciją ties 280 nm (A280), nustatoma pagal Biero-Lamberto dėsnį:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

kur:

  • \( C \) = Baltymų koncentracija (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbcija ties 280 nm
  • \( \epsilon \) = Ekstinkcijos koeficientas (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Kiuvetės kelio ilgis (cm)

Kas yra baltymų koncentracijos skaičiuoklė?

Baltymų koncentracijos skaičiuoklė padeda nustatyti baltymų koncentraciją naudojant skirtingus metodus, įskaitant:

  • Absorbciją ties 280 nm (A280): Greitas ir neardantis metodas, pagrįstas aromatinėmis aminorūgštimis.
  • Bradfordo tyrimą: Kolorimetrinis metodas, naudojantis dažų surišimą.
  • BCA (bicinchonino rūgšties) tyrimą: Metodas, pagrįstas vario redukcija ir kolorimetriniu nustatymu.
  • Lowry tyrimą: Gerai žinomas metodas, naudojantis baltymų ir vario sąveiką.

Kaip naudotis skaičiuokle

Atlikite šiuos veiksmus, kad apskaičiuotumėte baltymų koncentraciją:

  • Pasirinkite matavimo metodą (A280, Bradfordo, BCA arba Lowry).
  • Įveskite reikiamas reikšmes, tokias kaip absorbcija, skiedimo koeficientas ir ekstinkcijos koeficientas (jei reikia).
  • Jei naudojate standartinės kreivės metodą (Bradfordo, BCA arba Lowry), įveskite kreivės parametrus.
  • Spustelėkite mygtuką "Apskaičiuoti", kad gautumėte koncentracijos rezultatą.

Skaičiuoklės naudojimo privalumai

  • Taupo laiką automatizuodamas koncentracijos skaičiavimus.
  • Palaiko kelis matavimo metodus, užtikrindamas lankstumą.
  • Apima skiedimo skaičiuoklę, skirtą konkrečioms koncentracijoms paruošti.
  • Sumažina žmogiškąsias klaidas atliekant rankinius skaičiavimus.

DUK

1. Kiek tikslus yra absorbcijos (A280) metodas?

A280 metodas paprastai yra tikslus grynų baltymų atveju, tačiau gali būti paveiktas priemaišų, tokių kaip nukleorūgštys.

2. Ar galiu naudoti Bradfordo tyrimą visiems baltymams?

Bradfordo tyrimas tinka daugumai baltymų, tačiau rezultatai gali skirtis priklausomai nuo baltymų sudėties.

3. Koks yra BCA tyrimo privalumas?

BCA metodas yra labiau suderinamas su plovikliais ir turi platesnį linijinį diapazoną nei Bradfordo metodas.

4. Kaip pasirinkti teisingą ekstinkcijos koeficientą A280?

Naudokite paskelbtas vertes žinomiems baltymams arba apskaičiuokite ekstinkcijos koeficientą pagal aminorūgščių sudėtį.

5. Kodėl man reikia skiedimo koeficiento?

Jei jūsų mėginys prieš matavimą buvo praskiestas, turite padauginti apskaičiuotą koncentraciją iš skiedimo koeficiento, kad gautumėte teisingą galutinę koncentraciją.